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    血漿游離血紅蛋白測定

    更新時間:2012-10-15   點擊次數(shù):2675次

    血漿游離血紅蛋白實驗原理  

     血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態(tài)氧,使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化,由無色zui終變?yōu)樗{紫色。根據(jù)顯色深淺與標準進行比較,可測出其含量。

    實驗方法

      材料:
      1.2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
      2.1%H2O2
      3.10%醋酸溶液
      4.分光光度計
      方法:
      1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。
      2.按下表進行操作,用分光光度計,波長為530nm,以空白管調(diào)零,測定測定管的吸光度。

    試劑 (ml)
    測定管
    空白管
    2 g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
    0.5
    0.5
    患者血漿
    0.02
    /
    1% H2O2
    0.5
    0.5
    混勻后室溫放置10min
    10%醋酸溶液
    5.0
    5.0
    室溫放置10min

      3.計算公式
      血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標準管吸光度×100
    實驗結(jié)果計算
      參考范圍:0-40mg/L
    注意事項
      1.一切容器避免血紅蛋白污染;
      2.采血要順利,器皿要干燥,檢測血漿要新鮮,及時分離,防止人為溶血;
      3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性,檢測時要小心,廢液要妥善處理,以免污染;
      4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準確。

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